Флуоресцентна in situ хибридизация
Флуоресцентната in situ хибридизация (FISH) е една от няколкото техники, използвани за претърсване на ДНК на клетките ви, търсейки наличието или отсъствието на специфични гени или части от гени.
Много различни видове рак са свързани с известни генетични аномалии. И по генетичен начин не говорим само за наследствеността. В продължение на цял живот клетките могат да правят грешки, когато се разделят и растат.
Мутации в ДНК, които са свързани с рак, могат да се натрупват в тези клетки.
Как функционира рибата?
FISH е техника, която използва флуоресцентни сонди за откриване на специфични гени или части от гени (ДНК последователности). Медицинските служители в лабораторията и онколозите използват FISH, за да помогнат при оценяването на пациентите, които могат да имат рак, а понякога и при пациентите, които вече са диагностицирани с рак и са лекувани.
FISH може да се направи, като се използват различни видове проби в зависимост от местоположението и вида на предполагаемия рак: Туморни клетки, получени от периферна кръв, биопсия на костен мозък или биопсия на лимфен възел и фиксирана с формалин парафин (това се отнася за проба от тъкан, която се обработва в лабораторията и се вгражда във вид на восък, което я прави по-твърда, така че тя може да бъде нарязана на тънки секции и монтирана за гледане под микроскоп).
Какво означават буквите?
"Н" в FISH се отнася до хибридизация.
При молекулярната хибридизация се използва белязана ДНК или РНК последователност като сонда - визуализирайте червена тухла от Лего, ако желаете. Сондата се използва за намиране на съответна Lego тухла или ДНК последователност в биологична проба.
ДНК в екземпляра ви е като купчини лего тухли и повечето тухли в тези купчини няма да съвпадат с червената ни сонда.
И всичките ви тухли са добре организирани в 23 чифта тухлени пилоти - всяка купчина е една от двойките хомоложни хромозоми, повече или по-малко. За разлика от леговите тухли, нашата червена сонда "Лего" е като силен магнит и намира своя мач, без да се налага да се сортира през купчинките.
"F" се отнася до флуоресценция. Нашата червена сонда може да се изгуби в купчините тухли, така че е обозначена с цветна флуоресцентна боя, така че тя да свети. Когато установи съответствие между 23 двойки пилоти, флуоресциращият маркер разкрива местоположението му. Така че сега можете да видите как изследователите и клиницистите могат да използват FISH, за да ви помогнат да определите къде (кой куп или коя хромозома) се намира за определен индивид.
"Аз" и "S" стоят на място . Това се отнася до факта, че нашата червена тухла Lego търси своя мач в извадката, която сте дали .
Какво за специфични случаи на рак на кръвта?
ФИШ и други хибридизационни процедури in situ се използват за диагностициране на различни хромозомни аномалии - промени в генетичния материал, промени в хромозомите, включително следното:
Заличаване - част от хромозомата е изчезнала
Транслокацията - част от една хромозома се разпада и се придържа към друга хромозома
Инверсия - част от хромозомата се разпада и отново се връща, но в обратен ред
Дублирането - част от хромозомата присъства в твърде много копия в клетката
Всеки тип рак може да има собствен набор от хромозомни промени и съответните сонди. FISH не само помага да се идентифицират първоначалните генетични промени в болестния процес като рак, но може да се използва и за мониторинг на отговора на терапията и ремисия на заболяването.
Генетичните промени, открити от FISH, понякога предлагат допълнителна информация за това как е вероятно да се държи ракът на дадено лице въз основа на това, което е било наблюдавано в миналото при хора със същия вид рак и подобни генетични промени. Понякога FISH се използва, след като диагнозата вече е направена, за да се събере допълнителна информация, която може да помогне да се предскаже изходът на пациента или най-доброто лечение.
FISH може да идентифицира хромозомни аномалии при левкемии , включително при хронична лимфоцитна левкемия (CLL). За хронична лимфоцитна левкемия / малък лимфоцитен лимфом FISH позволява на пациентите да открият прогностичната си категория: добра, междинна или бедна. При остра лимфобластна левкемия (ALL), генетиката на левкемичните клетки може да ви разкаже за нивото на риска от рак и да ви помогне да ръководите терапевтичните решения.
Панелите FISH също са на разположение за лимфом, множествена миелома, пролиферативни нарушения на плазмените клетки и миелодиспластичен синдром. В случая на лимфома на мантийната клетка, например, има транслокация, която FISH може да открие, наречена GH / CCND1 t (11; 14), която често се свързва с този лимфом.
Защо РИБА?
Предимството на FISH е, че не трябва да се извършва върху клетки, които активно се разделят. Цитогенетичното изследване обикновено отнема около три седмици, тъй като раковите клетки трябва да растат в лабораторни съдове за около 2 седмици преди те да бъдат тествани. Обратно, резултатите от FISH обикновено се предлагат от лабораторията в рамките на няколко дни.
> Източници:
> Китогенно тестване на цитогенетични кодове за CPT.
> Флуоресцентна in situ хибридизация (FISH). http://www.genome.gov/10000206#al-2.
> Флуоресцентна in situ хибридизация (FISH). http://www.nature.com/scitable/topicpage/fluorescence-in-situ-hybridization-fish-327.
> Wolff DJ, Bagg A, Cooley LD, et al. Ръководство за флуоресцентно in situ хибридизационно изпитване при хематологични заболявания. Списание за молекулярна диагностика: JMD. 2007; 9 (2): 134-143.